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Celetrix Electroporation

From small scale to large scale

Human Cultured NK cells

          在电转条件上,原代纯化NK细胞和PBMC电转比较类似。这些细胞在未刺激培养时,直径比较小,只有7-8um,电转需要的电压比普通细胞系高很多,可以直接参照PBMC的电转条件进行操作。

 

       刺激培养的NK的细胞在生长过程中体积会变大。因为大体积细胞需要电压较低,所以刺激培养的NK细胞电转需要的电压会比原代NK细胞低很多,和普通细胞系电转电压类似,使用Cell line模式电转即可。

 

 

         我们测试了不同的NK细胞刺激培养方案,目前表现比较好的是加Feeder cell培养,比液体培养基的好一些。刺激培养6天的NK细胞电转GFP转座子后再培养8天,GFP阳性率可以维持50%。不同刺激培养条件的NK细胞,为了达到高效率转染并且保持细胞良好的生长活性,细胞刺激时间以及电转的电压都需要经过仔细测试。

Human Cultured NK cells插图
Human Cultured NK cells插图1

刺激培养6天NK细胞电转GFP转座子后48小时GFP阳性率80%,再接着培养8天GFP阳性率维持在50%。

Human Cultured NK cells in 20ul tubes

  Cell Number:1-2*10^6 cells

  Plasmid:2ug

  E buffer:Celetrix buffer

  Suggested parameter:Cell Line Mode,480V-540V

  Culture medium: 无抗生素NK细胞培养基

Human Cultured NK cells in 100ul tubes

  Cell Number:5-10*10^6 cells

  Plasmid:10ug

  E buffer:Celetrix buffer

  Suggested parameter:Cell Line Mode,480V-540V

  Culture medium: 无抗生素NK细胞培养基